Изучено влияние продуктов распада коллагена (ПРК) на основе кисломолочного комплекса (КМК1) с молекулярной массой 46000-48000 угл. ед. на процессы репаративной регенерации условно асептических полнослойных плоскостных ран кожи крыс. Установлено, что использование исследуемого препарата значительно сокращает сроки заживления ран, приводя к формированию полноценного регенерата без образования соединительнотканного рубца.
На современном этапе возможности хирургии позволяют влиять не только на сроки заживления раневых поверхностей, но и учитывать эстетические аспекты получения как можно менее заметных рубцов после травм и оперативных вмешательств [1,2,]. Следовательно, остается актуальным поиск новых средств, влияющих на процессы репаративной регенерации, оказывая как стимулирующее влияние, так и предотвращающих формирование рубцов. Особенно тяжелым последствием после восстановления кожи является появление келоидных рубцов, возникающих в результате нарушения ауторегуляции соединительной ткани, в результате которой усиливается продукция коллагена [7].
В свою очередь, присутствующие в раневой поверхности поврежденные коллагеновые волокна, стимулируют миграцию и функциональную активность фибробластов, которые играют ключевую роль в процессе регенерации [5].
Следовательно, поиск новых веществ, стимулирующих процессы регенерации, должен быть направлен на регуляцию синтеза коллагена.
В настоящее время для решения этой проблемы успешно применяются различные коллагенсодержащие препараты [3,4,6]. В восточно-сибирском государственном университете технологий и управления, на кафедре «технология кожи и меха» были получены продукты растворения коллагена. Данные вещества получали путем разрушения кислотолабильных связей в структуре коллагена уксусной кислотой и различными молочнокислыми комплексами. В результате были получены продукты растворения коллагена (ПРК) с различной молекулярной массой и вязкостью [8].
Целью нашей работы явилось изучение на экспериментальном материале динамики заживления условно асептических полнослойных плоскостных ран кожи крыс без лечения и при стимуляции репаративных процессов продуктами распада коллагена (ПРК) на основе кисломолочного комплекса (КМК1). Молекулярная масса данных продуктов растворения коллагена составила 46000-48000 угл. ед.
Материалы и методы. Эксперимент проведен на 30 белых беспородных крысах – самцах, в возрасте 6 мес., массой тела 250-300 гр. Крыс содержали в стандартных условиях вивария со свободным доступом к воде и пище. Для создания травматической модели на коже спины в межлопаточной области после депиляции под эфирным наркозом удалялся полнослойный кожный лоскут размерами 1,0x1,0 см (Рис.1). Операции и все манипуляции с животными проводились с использованием общего обезболивания, а эвтаназия - путем передозировки средств для наркоза с учетом положений, регламентируемых приложением № 8 («Правила гуманного обращения с лабораторными животными»), «Санитарных правил по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев)». На всем протяжении эксперимента рана оставалась открытой. Животные содержались в индивидуальных клетках.
В связи с поставленной целью крысы были разделены на две группы, по 15 крыс в каждой: I - контрольная группа – заживление проходило самостоятельно под струпом, II – экспериментальная группа – для заживления ран использовали аппликации ПРК на основе КМК1. Забор материала осуществлялся на 3, 7, 14, 21 и 28 сутки. Морфологический материал подвергался стандартной заливке в парафин, полученные препараты окрашивали гематоксилин-эозином и по методу Ван-Гизона. Морфометрию проводили с применением программного обеспечения МЕКОС. Статистическая обработка полученных результатов выполнена непараметрическим методом (критерий Манна-Уитни) с определением достоверности различий при достигнутом уровне значимости р≤0,05.
Полученные результаты. В ходе проведенного исследования были установлены достоверные различия в эффективности и скорости ранозаживления. Отмечалось, что заживление ран в контрольной группе проходило медленнее, характеризовалось низкой пролиферативной активностью эпителия и соединительной ткани, малым количеством сосудов в грануляционной ткани, более поздними сроками ее созревания по сравнению с экспериментальной группой. Так, отторжение струпа и формирование многослойного плоского эпителия с верификацией всех его слоев в экспериментальной группе наблюдалось на 11,8±0,9 сутки (Рис.2),в то время как у животных контрольной группы струп к этому времени не отторгся (Рис.3) . Аналогичные изменения у животных контрольной группы произошли лишь на 19,8±1,2 сутки (р≥0,01). Полное заживление ран с восстановлением волосяных фолликулов и сальных желез в дерме кожи протекало на 17,4±0,6 сутки при использовании ПРК на основе КМК 1, в контрольной группе на 26,4±1,7 сутки (р≥0,01). Толщина эпидермиса на 14 сутки в экспериментальной группе составила 56,08±3,45 мкм, в контрольной группе в этот период эпителизации не наблюдалось. Количество волосяных фолликулов в поле зрения на 28 сутки в контрольной группе составляло 2,6±0,5, в экспериментальной группе - 9,7±1,2 (р≥0,01). Причем в экспериментальной группе при заборе материала отмечалось, что кожа была мягкой эластичной не спаянной с подлежащими тканями, в то время как в контрольной группе часто формировались плотные соединительнотканные рубцы.
Таким образом, на заживление раневой поверхности влияют изменения местных процессов в раневой зоне. Воздействие экзогенных продуктов растворения коллагена, содержащихся в исследуемом веществе, привело к активации фибробластов, что ускорило процессы репаративной регенерации. Вероятно, содержание кисломолочных продуктов способствовало регуляции процессов коллагеногенеза, предотвращая развитие соединительнотканных рубцов.
Вывод: использование продуктов распада коллагена на основе кисломолочного комплекса 1 (молекулярная масса 46000-48000 угл. ед.) влияет на процессы заживления ран, значительно сокращая их сроки.
1. Аксёнов К.А., Ломакин М.В. Визуальная оценка данных экспериментального исследования заживления хирургических ран в полости рта //Российская стоматология.- 2010. - №1- С.69-72
2. Аксёнов К.А., Ломакин М.В., Капанадзе Г.Д., Смешко Н.В. Экспериментальное моделирование заживления хирургических ран в полости рта //Биомедицина.- 2011.- Т. 1, № 1. - С. 34-41
3. Белова С.В., Бабушкина И.В., Гладкова Е.В. и др. Регенерация экспериментальной гнойной раны и процессы свободнорадикального окисления при использовании наночастиц металлов и хитозана //Дальневосточный медицинский журнал.- 2014.- №3.-С.79-82
4. Брайловская Т.В., Федорина Т.А. Морфологическая характеристика течения раневого процесса при экспериментальном моделировании резаных и рвано-ушибленных кожных ран // Биомедицина.- 2009.-№1.- С. 68-74
5. Никитенко В.И., Павловичев С.А., Полякова В.С. и др. Использование факторов роста фибробластов для лечения ран и ожогов //Хирургия.- 2012.- №12. – С. 72-76
6. Парамонов Б. А., Антонов С.Ф., Нугаев Т.Ш. и др. Ранозаживляющая эффективность каллоген-хитозановых губок серии «Хитоскин» //Инфекции в хирургии.-2011.-Т.9, №3.- С.17-23
7. Пинелис И.С. Келоидные рубцы и их лечение //Забайкальский медицинский журнал.-2013. - №2 – С.51-55
8. Шалбуев Д.В. Экобиотехнологический способ пикелевания овчинно-шубного сырья // Кожевенно-обувная промышленность.- 2009.- №1- С. 36-39