Skip to Content

Методические особенности моделирования панкреонекроза с использованием в качестве модельного животного свиньи

ID: 2016-11-7-R-9782
Обзор
Военно-медицинская академия им. С.М.Кирова, г. Санкт-Петербург

Резюме

нет

Ключевые слова

панкреонекроз, модельное животное, свинья

Обзор

Острый панкреатит (ОП) занимает лидирующую позицию по частоте встречаемости среди всех ургентных состояний в абдоминальной хирургии [1, 17]. На его долю приходится около трети от всего количества поступающих в хирургические стационары [1, 2]. Особую проблему в ургентной хирургии представляет острый деструктивный панкреатит (ОДП), который встречается в 15-20% наблюдений, а смертельный исход наблюдается практически у каждого второго пациента [2-4]. Столь высокая летальность в данной группе пациентов на первой неделе течения заболевания связана с развитием панкреонекроза и эндотоксикоза, которые вызывают системную воспалительную реакцию (СВРО) и развитие полиорганной недостаточности (ПОН) [4-8, 15].

Углубление представлений о патогенезе ОП, необходимое для разработки и повышения эффективности существующих лечебно-диагностических технологий, невозможно без исследования спорных и нерешенных в настоящее время вопросов на экспериментальных моделях патологического процесса [14, 16, 18]. При этом моделирование в биомедицинских технологиях, представляет собой комплексную научно-клиническую задачу, решение которой не возможно без использования принципов и методов системного анализа [9, 10, 18]. Традиционно способы индукции панкреонекроза принято классифицировать на каналикулярно-гипертензионные, сосудисто-аллергические, травматические, токсико-аллергические и смешанные [14, 16, 18]. По мнению ряда исследователей «идеальная» экспериментальная модель на животных должна отвечать ряду требований [16]:

  • должна быть легко воспроизводимой, простой и удобной;
  • должна давать возможность варьировать степенью тяжести ОП в зависимости от поставленных задач эксперимента;
  • морфология и физиология гепатобиллиарной системы должна быть максимально приближена к условиям человеческого организма.

Наиболее часто в экспериментальной панкреатологии используются модели, предусматривающие введение в панкреатический или общий желчный проток модельного животного веществ природного (жёлчь, желудочный сок, кишечное содержимое) или синтетического происхождения (таурохолат натрия, гликодезоксихолевая кислота, трипсин и др.) на фоне стимуляции секреторной функции поджелудочной железы.

Общим недостатком каналикулярно-гипертензионных моделей является высокая травматичность и, как следствие, низкая продолжительность жизни экспериментальных животных, а также технические сложности моделирования у разных видов лабораторных животных – грызунов, собак и кроликов.

Учитывая вышесказанное, целью настоящего исследования являлась разработка оригинальной экспериментальной методики моделирования панкреонекроза у лабораторных животных.

Материалы и методы. Исследование проводилось на свиньях породы «Вьетнамская вислобрюхая», массой от 40 до 68 кг (n = 8), в строгом соответствии с соблюдением принципов Хельсинкской декларации о гуманном отношении к животным.

Все животные в течение 2 недель находились в условиях карантина, за сутки до эксперимента содержались без доступа к пище, но со свободным доступом к воде. В день эксперимента животных не поили. Основную группу составили 5 животных, контрольную – 3.

Животные основной группы после контрольного взвешивания помещалось на операционный стол и фиксировалось в положении «на спине» с разведенными конечностями. Для инвазивного мониторинга артериального давления интраартериально устанавливался интродьюсер 4F, а для заборов крови и проведения инфузионной терапии внутривенно устанавливался интродьюсер 6F.

Для проведения анестезии использовали «Золетил 100», в состав которого входят Тилетамина гидрохлорид — общий анестетик с выраженным анальгетическим эффектом и Золазепама гидрохлорид — транквилизатор. Доза подбиралась индивидуально и вводилась внутримышечно из расчета 10 мг/кг веса животного, путем титрования до достижения эффекта общей анестезии. В процессе подготовки к лапаротомии животные интубировались, оперативное вмешательство проводилось при самостоятельном дыхании.

Мониторинг жизненно важных функций (число сердечных сокращений, артериальное давление, сатурация гемоглобина, температура тела животного) осуществлялся аппаратом Siemens SC 9000XL. Исследование выполнялось с соблюдением правил асептики и антисептики, принятых в клинической практике.

Моделирование острого панкреатита. После обработки операционного поля выполнялась срединная лапаротомия разрезом 20 см по срединной линии.

Для экспозиции передней поверхности поджелудочной железы желудок отводили вверх, мобилизовывали двенадцатиперстную кишку по Кохеру, рассекая брюшину сбоку от ее первой, второй и третьей частей. Мобилизацию и выделение продолжали в медиальном направлении, рассекая брюшину передней поверхности печеночно-двенадцатиперстной связки, чтобы было хорошо видно общий желчный проток и печеночную артерию.

Двенадцатиперстную кишку мобилизовывали от забрюшинного пространства путем тупой диссекции позади головки поджелудочной железы, общего желчного протока и передней части кишки. Общий желчный проток выделяли тупо с помощью тупфера с медиальной стороны до латеральной. При этом, для облегчения его выделения, в сальниковое отверстие позади протока вводили палец для создания противодавления.

После визуализации гепатобилиарной системы осуществялась пункция желчного пузыря с выполнением аспирации 20 мл аутожёлчи 2-х компонентным шприцом, после чего с целью идентификации большого дуоденального сосочка (БДС) производилась дуоденотомия.

Далее выполнялось наложение зажимов «Бильрот» на 2 мм ниже пузырного протока. Затем при помощи шприца осуществлялось введение 20 мл аутожёлчи через БДС в главный проток ПЖ с дальнейшей часовой экспозицией.

По окончании эксперимента животные выводились из эксперимента инъекцией летальной дозы анестетика, после чего проводилось их секционное исследование, в ходе которого выполняли забор ткани ПЖ для последующего гистологического и электронно-микроскопического исследования.

Заключение. Предложенная модель острого панкреатита позволяет сформировать адекватную патогенетическую основу формирования ОП, течение которого в максимальной степени соответствует таковому, наблюдающемуся у человека.

Исследование патологических проявлений ОП на предложенной модели позволит идентифицировать, в настоящее время не исследованные аспекты заболевания, включая молекулярно-клеточные, микроморфологические проявления ранних фаз заболевания, позволят усилить доказательность медикаментозных и немедикаментозных методов коррекции патологических изменений, уточнить организационные аспекты оказания медицинской помощи таким больным, а так же разработать методы молекулярной реабилитации ключевых патологических состояний [11, 12].

Литература

  1. Савельев В.С., Буянов В.М., Огнев В.Ю. Острый панкреатит / под ред. В.С. Савельева. Москва: Медицина, 1983. 240 с.
  2. Савельев В.С. Деструктивный панкреатит в свете современных представлений о сепсисе // Анналы хирургии. 1999. № 5. С. 26.
  3. Савельев В.С., Филимонов М.И., Бурневич С.З. Панкреонекрозы. М., 2008. 264 с.
  4. Бурневич С.З. Деструктивный панкреатит: современное состояние проблемы // Вестник хирургии. 2000. № 2 (159). С. 116-123.
  5. Паскарь С.В. Диагностика острого деструктивного билиарного панкреатита. Вестн. хирургии им. И.И. Грекова, 2008. № 2. С. 29-33.
  6. Вашетко Р.В., Кремнев К.С. К вопросу о терминологии и классификации острых панкреатитов // Матер. VII Всерос. конф. общих хирургов с междунар. участием совместно с Пленумом проблемных комиссий «Неотложная 200 хирургия» и «Инфекция в хирургии» Межведомст. науч. совета по хирургии РАМН и МзиСР РФ. Красноярск, 2012. С. 41-43.
  7. Гостищев В.К., Хрупкин В.И., Афанасьев А.Н., Кириллин А.В., Селиванова О.Н., Шалыгин А.Б. Лечебно-диагностическая тактика при остром деструктивном панкреатите в зависимости от показателей интегральных шкал тяжести // Матер. VII Всерос. конф. общих хирургов с междунар. участием совместно с Пленумом проблемных комиссий «Неотложная хирургия» и «Инфекция в хирургии» Межведомств. науч. совета по хирургии РАМН и МзиСР РФ. Красноярск, 2012. С. 66-71.
  8. Ермолов А.С., Турко А.П., Карнаушенко П.В. Хирургическая помощь при острых заболеваниях органов брюшной полости в Москве в 1995-2009 гг. // Прил. к Вестн. СпбГУ. Серия 11: Медицина / Всерос. форум «Пироговская хирургическая неделя». 2010. С. 43-44.
  9. Избранные технологии диагностики: Монография / В.М. Еськов и др.; под ред. А.А. Хадарцева, В.Г. Зилова, Н.А. Фудина. Тула: ООО РИФ «ИНФРА», 2008. 296 с.
  10. Системные подходы в биологии и медицине (системный анализ, управление и обработка информации) / В.И. Стародубов и др.; под ред. А.А. Хадарцева, В.М. Еськова, А.А. Яшина, К.М. Козырева. Тула: ООО РИФ «ИНФРА», 2008. 372 с.
  11. Фирсова В. Г., Паршиков В. В., Градусов В. П. Острый панкреатит: современные аспекты патогенеза и классификации // Соврем. технол. мед.. 2011. №2. С.127-134.
  12. Молекулярные механизмы иммунореабилитации при использовании низкоинтенсивного СВЧ-излучения / И.В. Терехов, В.И. Петросян, Б.Л. Дягилев и др. // Бюллетень медицинских интернет-конференций. 2011. Т.1. № 5. С. 34-37.
  13. Cruz-Santamaria DM, Taxonera C, Giner M. Update on pathogenesis and clinical management of acute pancreatitis. World J Gastrointest Pathophysiol. 2012; 3(3):60-70.
  14. Heinkel K. The rat as experimental animal in experimental diagnosis of pancreas. II. Production of acute hemorrhagic pancreatitis by injection of bile acid into ductuspancreaticus. KlinWochenschr. 1953; 31(33-34):815.
  15. Sah RP, Saluja A. Molecular mechanisms of pancreatic injury. Curr Opin Gastroenterol. 2011; 27(5):444-451.
  16. Su KH, Cuthbertson C, Christophi C. Review of experimental animal models of acute pancreatitis. HPB (Oxford). 2006; 8(4): 264–286.
  17. Yadav D, Lowenfels AB. The epidemiology of pancreatitis and pancreatic cancer. Gastroenterology. 2013; 144(6):1252-1261.
  18. Zhao J-B,Liao D-H, Nissen TD. Animal models of pancreatitis: Can it be translated to human pain study? World J Gastroenterol. 2013; 19(42): 7222–7230.
2
Ваша оценка: Нет Средняя: 2 (1 голос)



Оптимальный хостинг для Drupal, Wordpress, Joomla, Битрикс и других CMS, быстрые и надежные сервера, круглосуточная техподдержка Яндекс.Метрика