Skip to Content

Исследование антиксантиноксидазной активности эффекторов, выделенных из листьев земляники

ID: 2021-01-2076-A-19506
Оригинальная статья (свободная структура)
Тюменский государственный медицинский университет

Резюме

По данным литературных источников фенольные соединения, обладая структурными сходствами с ксантином, способны по конкурентному механизму ингибировать ксантиноксидазу. Земляника является источником данных соединений, и, следовательно, перспективным объектом для выделения новых природных эффекторов. Выделение и очистка данных соединений, определение их химической структуры, будет служить основой для создания новых средств фармакокоррекции нарушений обмена пуриновых нуклеотидов. Оптимальными условиями для выделения ингибиторов ксантиноксидазы является извлечение 0,1 М раствором аммиака или водное извлечение. При использовании этанола экстрагируются эффекторы, активирующие ксантиоксидазу. Компоненты водного (1,25 мг/мл) и аммиачного (5 мг/мл) снижают активность ксантиноксидазы на 100%. Этанольные экстракты активируют ксантиноксидазу в 3-5-раз. В водных и аммиачных экстрактах обнаружены дубильные вещества; в спиртовых извлечениях – флавоноиды.

Ключевые слова

Земляника, ксантиноксидаза, эффекторы

Статья

Актуальность. Земляника лесная – растение семейства Розовые, широко распространенное в лесной и лесостепной зонах европейской части России, Сибири, Белоруссии, Украине, а также в некоторых других областях Евразии. Земляника нашла широкое применение как в народной, так и в официнальной медицине. В листьях земляники содержатся флавоноиды, дубильные вещества, органические кислоты, витамины группы В, соли железа, кобальта, марганца. Настои листьев земляники часто используются как мочегонное средство при мочекаменной и желчнокаменной болезни, а также лечении подагры.

По данным литературных источников фенольные соединения, обладая структурными сходствами с ксантином, способны по конкурентному механизму ингибировать ксантиноксидазу. Земляника является источником данных соединений, и, следовательно, перспективным объектом для выделения новых природных эффекторов. Выделение и очистка данных соединений, определение их химической структуры, будет служить основой для создания новых средств фармакокоррекции нарушений обмена пуриновых нуклеотидов.

Цель работы – исследование химической природы и антиксантиноксидазной активности эффекторов, выделенных из листьев земляники. Задачи: 1. Получить сухие экстракты листьев земляники, используя разные экстрагенты. Выбрать оптимальные условия экстракции для получения эффекторов. 2. Провести оценку влияния полученных экстрактов на ксантиоксидазу молока. 3. Определить химическую природу выделенных эффекторов.

Материалы и методы. Экстракцию листьев земляники проводили в течение часа (при температуре 60ºС) [1], используя экстрагенты: 0,1 М раствор аммиака, 0,1 М раствор уксусной кислоты, воду и этанол различной концентрации (50%, 70%, 96%). Экстракты высушивали и на водяной бане и получали растворы с концентрацией 10 мг/мл; 5 мг/мл; 2,5 мг/мл и 1,25 мг/мл. Активность ксантиноксидазы молока определяли спектрофотометрическим методом, по используемой ранее методике [2], добавляя в тест-систему: 2 мл обезжиренного молока, 0,2 мл субстрата кофеина, 0,2 мл экстракта) и 50 мкл окислительно-восстановительного индикатора. В качестве положительного контроля использовали ингибитор ксантиноксидазы аллопуринол (5 мг/мл). Отрицательный контроль содержал цитратный буферный раствор, вместо экстракта (pH=10).

Идентификацию компонентов экстракта проводили с помощью цветных реакций и методом тонкослойной хроматографии (ТСХ). В качестве подвижной фазы использовали 70% этанол. После проведения хроматографии, пластинки высушивали и проявляли в УФ-свете.

Результаты и обсуждение. Аммиачные и водные извлечения из листьев земляники демонстрируют антиксантиноксидазную активность (в концентрации 5 мг/мл для аммиачного и 1,25 мг/мл для водного извлечения активность ксантиноксидазы снижается на 100%). В данных экстрактах обнаруживаются дубильные вещества (полифенолы), которые специфически проявляются в УФ-свете при постановке ТСХ. Кислотное извлечение не показало чёткой тенденции к ингибированию ксантиноксидазы.

Однако компоненты этанольных экстрактов листьев земляники обладают активирующим влиянием на ксантиноксидазу (активность увеличивается в 3-5 раз). Это может быть обусловлено присутствием в экстрактах флавоноидов, поскольку при проведении ТСХ на пластинках проявляются пятна, специфически окрашивающиеся при проявлении в УФ-свете и обработке раствором аммиака. Спиртовые извлечения также давали положительные реакции с хлоридом железа (III) и пробу Шинода. При этом наибольшую активность в отношении фермента показал 96% этанольный экстракт, который содержал флавоноидов существенно больше, чем другие извлечения.

Выводы:

1. Оптимальными условиями для выделения ингибиторов ксантиноксидазы является извлечение 0,1 М раствором аммиака или водное извлечение. При использовании этанола экстрагируются эффекторы, активирующие ксантиоксидазу.

2. Компоненты водного (1,25 мг/мл) и аммиачного (5 мг/мл) снижают активность ксантиноксидазы на 100%. Этанольные экстракты активируют ксантиноксидазу в 3-5-раз.

3. В водных и аммиачных экстрактах обнаружены дубильные вещества; в спиртовых извлечениях – флавоноиды.

Литература

1. Буслаева Н.Н., Калинин Е.П. К вопросу о выборе лабораторных методов оценки антикоагулянтного действия новых фармакологических соединений. Материалы конференции: Молекулярные аспекты химии, фармацевтики и фармакологии. М.: Издательство «Перо» 14 с., Москва, 2020.

2. Панина, С.Б. Роль антиоксидантной системы и провоспалительных цитокинов в механизмах развития гонартроза: дисс. …кан. биол. наук: 03.01.04. - Ростов на-Дону, 2016. – 149 с.

0
Ваша оценка: Нет



Яндекс.Метрика