Влияние наночастиц серебра на адгезивную активность штаммов
Escherichiacoliи Pseudomonasaeruginosa
Вельмакин С.Е., Сакулина Л.Б., Шаповал О.Г.
Научный руководитель: д.м.н., профессор Шуб Г.М.
ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Минздрава РФ
Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
Адгезия бактерий является начальным этапом формирования биопленок и может быть блокирована под действием различных антимикробных факторов, в том числе наночастиц серебра. Грамотрицательные бактерии характеризуются большим адгезивным потенциалом и быстрым формированием биопленок. Поэтому изучение возможного влияния наночастиц серебра на процесс адгезии таких микроорганизмов представляет теоретический и практический интерес.
Цель исследования - оценка влияния наночастиц серебра на процесс адгезии двух видов грамотрицательных бактерий – E.coli и P.aeruginosa. Задачи включали определение минимальной ингибирующей концентрации (МИК) наночастиц и антибиотика гентамицина как препарата сравнения в отношении опытных штаммов, а также оценку адгезивной активности опытных культур и ее изменений под влиянием субингибирующих концентраций (¼ МИК) обоих веществ.
В работе использованы 5 штаммов P.aeruginosa (4 клинических и один стандартный - P.aeruginosa ATCC 27853) и 4 клинических штамма E.coli. Наночастицы серебра диаметром 20нм получены в Институте биохимии и физиологии растений и микроорганизмов Российской Академии наук. Чувствительность опытных штаммов к гентамицину и наночастицам серебра определяли методом двукратных серийных разведений в мясо-пептоном бульоне при микробной нагрузке 25×104 микробных тел/мл. Адгезивную активность определяли по методике В.И. Брилис и соавторов на свежих эритроцитах O(I) Rh(+) после суточной инкубации чистых культур в мясо-пептонном бульоне с ¼ МИК гентамицина, наночастиц серебра и в условиях отсутствия обоих препаратов (контроле). Ее выражали по среднему показателю адгезии (СПА), то есть по среднему значению бактериальных клеток, прикрепившихся к одному эритроциту.
В результате установлено, что все опытные штаммы E.coli и 1 клинический штамм P.aeruginosa обладали высокой, остальные штаммы P.aeruginosa – средней адгезивной активностью. После инкубации в ¼ МИК гентамицина СПА достоверно снизился по сравнению с контролем у всех клинических штаммов обоих видов, а у стандартного штамма он достоверно не отличался от контрольного значения. Инкубация в ¼ МИК наночастиц привела к снижению адгезивной активности у всех штаммов и по сравнению с гентамицином более существенно у 2 штаммов E.coli и 4 штаммов P.aeruginosa, включая стандартный.
Таким образом, наночастицы серебра угнетают адгезивную активность штаммов обоих видов, превосходя для большинства подобное действие гентамицина.