Исследование полиморфизма в генах-кандидатах в последние годы является ведущим подходом при изучении роли генетической составляющей в патогенезе мультифакториальных заболеваний человека. На основании полученных результатов можно предположить, что наличие в генотипе аллеля T для изучаемого полиморфизма гена APOJ и присутствие аллели ε4 гена APOE обуславливает тенденцию к более ранним срокам начала БА.
Актуальность настоящего исследования определяется значительной распространенностью болезни Альцгеймера (БА). В большинстве экономически развитых стран на ее долю среди других причин деменции приходится от 50 до 70%. Исследование полиморфизма в генах-кандидатах в последние годы является ведущим подходом при изучении роли генетической составляющей в патогенезе мультифакториальных заболеваний человека [Lander E., Schork N.,1994].
Целью нашего исследования было сравнительное изучение частоты встречаемости заявленных аллелей у пациентов, страдающих БА.
Материалы и методы исследования. Проведено исследование образцов ДНК 70 пациентов ДАТ (59 женщин и 11 мужчин) в возрасте от 52 до 78 лет, находящихся на лечении в 20, 21 психиатрических отделениях 2 ГКБ им. В.И. Разумовского и ОКПБ Святой Софии. Диагностика БА проводилась на основании критериев МКБ-10 (1994), в соответствии с которыми определялись сенильный (рубрика F00.1) и пресенильный (рубрика F00.0) типы БА (СДАТ и ДАТ соответственно).
В настоящее время разработаны и внедрены в клиническую медицину фармакогенетические анализы, позволяющие считывать и обрабатывать большие объемы биологической информации. В работе использовалась методика, разработанная в Институте молекулярной биологии им. В.А.Энгельгарда РАН, основанная на гибридизации в микроячейках биологического чипа. Технология анализа генетического полиморфизма предполагает предварительную мультиплексную амплификацию фрагментов ДНК с использованием флуоресцентно меченых праймеров и добавление меченого продукта на биочип, где происходит его гибридизация с иммобилизированными в геле зондами. Ячейки с иммобилизованными зондами на планшете располагаются рядами, каждая ячейка содержит уникальный зонд. Возможность изучения полиморфизма генов на чипах в ходе исследования предоставлена ООО «Геночип», г. Саратов.
Результаты и обсуждение. В проведенных исследованиях обнаружены следующие распределения полиморфизма генов APOE и APOJ. Наиболее хорошо изучен ген аполипопротеина Е (АРОЕ). Активность белка АРОЕ у человека определяется носительством одного из трех аллелей гена АРОЕ: ε2 («дикий тип»), ε3 и ε4 [1, 4]. APOE (rs429358) с ДАТ – 70 % (полиморфизм был представлен по большей части гомозиготами по ε3/ε3 в 30% образцов, ε4/ε4 в 20% образцов, гетерозиготами ε3/ε4 составили 48%). Полиморфизм APOE (rs429358) пациентов с СДАТ был представлен по большей части гомозиготами по ε3/ε3 в 84% образцов, ε2/ε4 в 2% образцов, гетерозиготы ε2/ε3 составили 14%. Следует отметить, что гомозиготные варианты по ε4/ε4 отмечались только в группе пациентов с ДАТ и соответствовали пациенткам, у которых заболевание дебютировало раньше, чем у всех обследованных. Полученные данные согласуются с данными, что аллель ε2 обладает протективными свойствами и его наличие ассоциируется с пониженным риском БА и более поздним началом. В нашей работе гетерозиготы с ε2 встречались в очень небольшом количестве образцов, и все они соответствовали СДАТ.
Выявлен полиморфизм гена APOJ, маркера спорадических форм болезни Альцгеймера[1, 6]: APOJ (rs11136000) при ДАТ – 70% (C/C полиморфизм, т.е. «дикий» тип составил 45%, гетерозиготы C/T составили 25% и гомозиготы по рецессивному типу – T/T – были представлены 30% от всего количества исследованных образцов). APOJ (rs11136000) при СДАТ: обнаружено, что полиморфизм данного гена составляет 68% (C/C полиморфизм, т.е. «дикий» тип составил 48%, гетерозиготы C/T – 29% и гомозиготы T/T были представлены 23% от всего количества исследованных образцов). Продукт гена APOJ способствует, как полагают, защите нейронов при БА посредством удаления Aβ, предотвращения воспаления, подавления апоптоза нейронов и удаления погибших клеток [1, 2, 7]. В последнее время установлено, что полиморфизм гена APOJ (rs11136000) статистически значимо ассоциирован с риском развития БА [1, 3, 5]. Полиморфизмы C/T и T/T указывают на ослабление функции данного гена. Таким образом, в группе пациентов с ДАТ, около 20% пациентов, имеющих следующий вариант генотипа образца: ApoE (ε4/ ε4); ApoJ (T/T) может быть отнесена к группе риска по раннему началу заболевания и темпам ухудшения когнитивных функций в силу усиления процессов апоптоза и активации процессов воспаления.
Выводы. На основании полученных результатов можно предположить, что наличие в генотипе аллеля T для изучаемого полиморфизма гена APOJ и присутствие аллели ε4 гена APOE обуславливает тенденцию к более ранним срокам начала БА.